Interleucina-7 Regula Negativamente O Desenvolvimento De Células T E A Expressão Gênica De Timos Adultos Em Cultura (Atoc) – Marina Oliveira E Paula

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Resumo:

A maturação dos linfócitos T a partir de progenitores comprometidos passa por estágios definidos e é principalmente associada à recombinação somática e expressão de genes de receptores de células T(TR); proliferação celular; seleção induzida por antígeno e aquisição de fenótipos maduros e de capacidades funcionais. A estrutura tridimensional do timo; bem como a ação das citocinas; é de fundamental importância durante esse processo de maturação dos timócitos. Ao contrário das culturas dispersas; a técnica de ATOC (Adult Thymus Organ Culture) preserva toda a arquitetura do timo e representa fielmente o microambiente onde ocorre a diferenciação de células T. Por esse motivo; esta técnica é tida como o modelo experimental ideal para o estudo da ação das citocinas nas células tímicas. A interleucina 7 tem papel fundamental durante todo o processo de maturação dos timócitos no timo; como garantir sua sobrevivência e estimular a recombinação V(D)J dos TR em rimos de feto quando se inicia a maturação de linfócitos T. No timo maduro; a IL-7 tem efeito contrário; inibindo o desenvolvimento de células T. O objetivo principal deste projeto foi avaliar o efeito do tratamento in vitro com IL-7 em células de timo de camundongos adultos (ATOC). A quantificação da recombinação V(D)j entre os segmentos TRVB8.1 e DB2.1 foi utilizada para avaliarmos se a IL-7 exógena poderia modular a maturação dos linfócitos Tem ATOC. Nossos resultados mostraram que o timo adulto em cultura abriga linfócitos T com o segmento recombinado; mas a IL-7 exógena não incrementou a frequência da recombinação V(D)J e; portanto; não estimulou a maturação destas células no timo adulto. Na realidade; existem evidências de que a IL-7 exerce efeito regulatório negativo no desenvolvimento progressivo de células T maduras. Com o intuito de avaliarmos então o efeito desta citocina sobre a expressão gênica de ATOC; utilizamos a tecnologia de cDNA micraarrays; incluindo programas de bioinformática; como SAM (Significance Analysis af Micraarrays) e Cluster & Tree View; para análise dos dados. Desta vez; foi possível mostrar que a IL-7 exógena em ATOC exerceu efeito regulatório negativo sobre a expressão de vários genes; ou seja; inibiu a expressão gênica. Dentre estes genes; salientamos Lck; Mapkapk2; Myb; Stat-1; Ubex1; Ube2r2; Ccl11; CD97; G3bp; Hspa1a; dentre outros; os quais estão envolvidos em processos celulares essenciais como metabolismo; resposta a estímulos; processos fisiológicos celulares; comunicação celular; ciclo celular e apoptose. Nossos resultados mostraram que o sistema modelo de ATOC; ensaio de recombinação V(D)J de TR e análise da expressão gênica por microarrays foi adequado para entendermos melhor as bases genético-moleculares do efeito regulatório negativo de IL-7 no timo adulto.

Detalhes:

  • Categoria: Teses e dissertações
  • Instituição: USP/RP/IMUNOLOGIA BÁSICA E APLICADA
  • Área de Conhecimento: IMUNOLOGIA
  • Nível: Mestrado
  • Ano da Tese: 2005
  • Tamanho: 3.32 MB
  • Fonte: Portal Domínio Público

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