Interação Não Opsonizante De Corynebacterium Diphtheria E Corynebacterium Ulcerans, Portadoras Ou Não De Fagos-Beta, Com Linhagens Celulares De Mamíferos – Cíntia Silva Dos Santos

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Resumo:

A incidência e gravidade das infecções associadas à Corynebacterium diphtheriae e Corynebacterium ulcerans tem aumentado em diversos países. Esforços são mundialmente dedicados à compreensão dos mecanismos de virulência de corinebactérias; uma vez que; tais infecções não foram ainda erradicadas. Uma vez que as interações entre bactérias e macrófagos determinam o curso da maioria das doenças infecciosas; o estudo de mecanismos moleculares da fagocitose não-opsonizante pode subsidiar o desenvolvimento de novas estratégias preventivas. Desta forma; os mecanismos de virulência de corinebactérias isoladas de infecções em humanos tornaram-se tema de grande interesse. Este trabalho teve como objetivo avaliar as interações bactérias-macrófagos na ausência de anticorpos opsonizantes e a infuência da produção de toxina diftérica e da fosfolipase D (pld) sobre este processo. Amostras de C. diphtheriae e C. ulcerans foram testadas quanto à capacidade de aderência; internalização e viabilidade intracelular em macrófagos U-937; em diferentes intervalos de infecção. Inibidores de componentes do citoesqueleto foram usados para investigar os mecanimos de internalização. A ocorrência de morte celular e alterações nucleares foram avaliadas pela coloração com azul de Tripan e por microscopia de fluorescência com DAPI. A fagocitose foi observada para todas as amostras testadas com percentuais diferenciados. A presença do gene tox pareceu influenciar a susceptibilidade das amostras às enzimas lisossomais celulares. A amostra tox+ apresentou os percentuais mais altos de bactérias viáveis associadas e internalizadas embora a maioria das bactérias foi observada principalmente nos sobrenadantes dos cultivos infectados. Após 24 horas de infecção foram observados baixos percentuais de internalização para todas as amostras. As maiores taxas de multiplicação nos sobrenadantes foram observadas para as amostras tox- ATCC 27010; tox+ HC01 e tox+CDC-KC279. Adicionalmente; a internalização das amostras tox+ e pld+ produziu efeitos citopáticos a partir de 3 horas de infecção. A citotoxidade aparentemente foi independente da multiplicação intracelular. A viabilidade intracelular em monocamada de macrófagos foi completamente inibida pela citocalasina E; genisteína e colchicina apenas para as amostras tox+. A ocorrência de fagocitose por macrófagos humanos U937 na ausência de anticorpos específicos e a persistência de amostras C. diphtheriae e C. ulcerans parece indicar que macrófagos humanos na ausência de anticorpos específicos não são eficientes na eliminação de infecções por estes agentes. Por outro lado; os dados sugeriram que amostras de C. diphtheriae e C. ulcerans exibem estratégias para sobrevivência em fagócitos independe da presença do gene tox. Entretanto; a infecção fágica promove; além da produção de toxina diftérica; a expressão de produtos biológicos que influenciam a resistência aos macrófagos humanos U-937 e o curso da fagocitose não-opsonizante. A expressão de outros fatores de virulência além da toxina diftérica pode favorecer a sobrevivência de corinebactérias com conseqüente desenvolvimento de quadros de difteria e/ou doenças bacterianas sistêmicas. Palavras-chave: Difteria; Corynebacterium diphtheriae; Corynebacterium ulcerans; macrófagos; interação celular; aderência; viabilidade intracelular.

Detalhes:

  • Categoria: Teses e dissertações
  • Instituição: UFRJ/CIÊNCIAS (MICROBIOLOGIA)
  • Área de Conhecimento: MICROBIOLOGIA
  • Nível: Doutorado
  • Ano da Tese: 2008
  • Tamanho: 10.83 MB
  • Fonte: Portal Domínio Público

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